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技術文章 / article
血清產生沉淀該如何避免？
2022-02-16 瀏覽次數：1054
怎么樣才能避免血清中產生沉淀呢？首先我們需要了解下什么是血清以及血清的主要作用指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋原白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞的起到某些保護作用。
主要作用
1.提供基本營養物質：氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等，是細胞生長必須的物質。
2.提供激素和各種生長因子：胰島素、腎上腺皮質激素（地塞米松）、類固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。
3.提供結合蛋白：結合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。
4.提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。
5.對培養中的細胞起到某些保護作用：有一些細胞，如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。這種作用是偶然發現的，則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保護細胞免受機械損傷，特別是在懸浮培養攪拌時，粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子，他們在代謝解毒中起重要作用，如SeO3,硒等
以下操作可以有效避免沉淀的產生：
（1） 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，如果不是必要可以跳過此步驟。
（2） 如果必須做血清的熱滅活，一定要記住56℃30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。如果溫度過高，時間過久或搖晃不均勻都會導致沉淀物的增多。
（3）在解凍血清時隨時準備搖晃均勻，使溫度及成分均一，這樣可以有效減少沉淀的發生。
（4） 血清分裝凍存時，須規則搖晃均勻（小心勿造成氣泡），使溫度與成分均一。
（5） 勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發生沉淀。
（6） 勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質。
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