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BHK-21 [C-13]倉鼠腎成纖維細胞培養傳代就像養孩子，甚至比養孩子還難。培養液的問題比較大。因 此配制培養液后一定要做無菌試驗，過濾時要注意濾膜本身及其安裝是否有問題；其次，要排除培 養液保存問題，比如，瓶蓋有裂隙或者是蓋子與瓶口不合，密閉性差，容易細菌污染。還有就是操 作過程中出了問題，不注意無菌操作，消毒不嚴格，造成培養液的污染。超凈工作臺、手的消毒， 拿培養瓶時不要拿蓋子及其周圍，培養液開蓋后要斜著放，瓶蓋橫放，蓋口不要向上或向下，培養 瓶等盡量放在工作臺的中間等等。總之，關鍵是無菌及無菌操作，做到這兩點應該不會出什么差錯 了。

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產品名稱：BHK-21 [C-13]倉鼠腎成纖維細胞培養傳代

庫存狀態：現貨

細胞規格：株

質控標準：無支原體、無污染、符合標準

運輸方式：新鮮運輸和凍存管運輸

貨期：新鮮運輸需要1-2周，凍存管運輸的需要2-3天

我公司致力于生物醫藥領域的技術研發與生物試劑的銷售，力求為中國廣大生物科技研究者提供zui快捷的貼心服務。公司集研發、銷售、實驗室技術服務于一體，并以多家歐美研究平臺先進的技術實力為依托，向中國市場提供品質國內價格的*服務，專業提供實驗所需的各類細胞株，因子，抗體等多種生物試劑。公司細胞主要來源ATCC,ECACC,ScienCell,ACC, Invitrogen 等，以及少數國內外大學建系。同時提供各種技術服務 整體課題 論文（SCI）服務等。輕小利，重品質。避浮夸，求務實。您的滿意，將是我們不懈的追求。竭誠歡迎廣大生物科技研究老師，前來咨詢合作

細胞培養中常見的污染情況總結
1、細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據感染細菌的不同，可有不同的外形，培養液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。
仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養液接觸的移液管等物品，連續兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養液是否存在渾濁的現象！可在培養液中加相應的抗生素處理
 
2、霉菌：培養液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質，37度孵箱培養2-3天，仍清亮，但出現絮狀雜質，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態變差，用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內，再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅。或者在培養箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉移，采用過氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把過氧乙酸放置在孵箱內一個小時，使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應定期清潔（2月左右），尤其在多雨的季節。其它培養箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外燈照。預防霉菌污染，可在培養基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或放線菌素D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或放線菌素D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞。，將環境*消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統污染，檢查一下培養基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
 
3、支原體：黑色的，好象多為多形，培養液一般培養液一般會渾濁，原體感染，國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死亡。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養，無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。
 
4、黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養的細胞中發現類似現象。對細胞生長狀態不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率。
 
5、真菌：一般培養液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發現，但是一旦發現有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
 
6、原蟲：培養液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養。這種共生是非常普遍的，但他們的數量小，細胞站優勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長，zui終形成惡性循環。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環境問題等等關于培養基的無菌狀況，取培養基至培養瓶中（不加細胞），37度試培養一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養基中事先加入雙抗（硫酸鏈霉素和氨芐青霉素）。但雙抗有時會影響細胞的狀態，所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結果。

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